Практическое значение цветных реакций

Цветные реакции, являясь универсальными (биуретовая, нингидриновая) и специфичными (реакция Фоля, ксантопротеиновая), позволяют установить белковую природу вещества, найти белок и аминокислоты в растворе, изучить состав белков и пептидов.

Принцип этих реакций употребляется для количественного определения аминокислот и белков в био жидкостях.

Оформление работы

Результаты оформляют в виде таблицы, где отмечают приобретенный цвет раствора и Практическое значение цветных реакций интенсивность расцветки. Интенсивность расцветки обозначают последующим образом: ‘’–‘’ отсутствие расцветки; ‘’+’’ слабенькая расцветка; ‘’++’’ мощная расцветка; ‘’+++’’ очень мощная расцветка.

Объект исследования Реакции
Биурето­вая Нингид­риновая Ксантопро­теиновая Фоля С нитро­пруссидом
Раствор яичного белка

В выводах указывается на возможность обнаружения пептидных связей и неких типов аминокислот с помощью применяемых Практическое значение цветных реакций реакций.

Лабораторная работа 2

Исследование наличия белка и свободных
аминокислот в био материале

Хим состав био жидкостей (кровь, моча, желудочный сок, слюна и т.п.) характеризуется всепостоянством и отражает состояние биохимических процессов, происходящих в органах и тканях. Отклонение от нормы в высококачественном и количественном составах био жидкостей может быть показателями патологического процесса Практическое значение цветных реакций.

Материал исследования

Сыворотка крови, слюна, моча.

Реактивы

1) 0,5% р-р нингидрина, 2) 10% р-р NaOH, 3) 10% р-р трихлоруксусной кислоты (ТХУ), 4) 5% р-р CuSO4.

Проведение анализа

С 5 каплями сыворотки, слюны и мочи проводят биуретовую реакцию (см. "Лабораторная работа 1"), определяя наличие либо отсутствие белка в пробах.

Последующие деяния зависят от наличия либо отсутствия белка в пробах:

o Практическое значение цветных реакций если жидкость не содержит белок, то с 10 каплями исследуемого материала проводят нингидриновую реакцию (см. "Лабораторная работа 1") для определения наличия либо отсутствия a‑аминокислот;

o если в воды находится белок, то для следующего исследования берут 20 капель био воды, в нее добавляют 5 капель 10% раствора ТХУ и нагревают до осаждения белка. Белок Практическое значение цветных реакций отделяют центрифугированием либо фильтрованием через картонный фильтр (за ранее смочив фильтр водой).

Дальше в безбелковом надосадке (либо фильтрате) при помощи нингидриновой реакции определяют наличие либо отсутствие a‑аминокислот. Для этого к нему добавляют 5 капель 0,5% р-ра нингидрина и нагревают в кипящей водяной бане.

Оформление работы

Результаты анализа заносят Практическое значение цветных реакций в таблицу. Знаками ‘’+’’ и "–‘’ отмечают результаты наблюдения.

Делают вывод о содержании белка и аминокислот в био жидкостях и его причинах.

Объект исследования Обнаруженные соединения
Белок Свободные аминокислоты
Сыворотка крови Слюна Моча

Практическое значение

Свойство био жидкостей изменять собственный состав при патологии отыскало применение в клинико-диагностических лабораториях для диагностики болезней и контроля исцеления Практическое значение цветных реакций. Многие способы определения веществ требуют наличия безбелковой воды, потому они начинаются с удаления белка из раствора методом фильтрации либо центрифугирования.

Цветные реакции на белок и аминокислоты употребляют в биохимических исследовательских работах для контроля полноты удаления белка из воды, наличия аминокислот в био средах, также высококачественного анализа белковых Практическое значение цветных реакций фармацевтических средств в лекарственной практике.

Тема 1.2.
Структура и физико-химические характеристики белков

Актуальность

Выделение белков из раствора (в том числе высаливание и денатурация) обширно употребляется в медицине для исследовательских целей, получения и чистки белковых фармацевтических препаратов, в экспериментальных исследовательских работах.

Цель

Изучить физико-химические характеристики белков (молекулярная масса, форма, ионизация, гидратация, растворимость) и главные Практическое значение цветных реакций типы структур белковых молекул.

Научиться осаждать белки из раствора различными способами и использовать способность к осаждению белков в лабораторной практике.

Вопросы для самоподготовки

1. Строение протеиногенных аминокислот. Образование пептидной связи в пептидах и белках.

Уровни организации структуры белковых молекул (первичная, вторичная, третичная, четвертичная).

Связи, участвующие в формировании уровней структуры белка Практическое значение цветных реакций. Многофункциональные группы аминокислот, ответственные за образование этих связей.

Четвертичная структура белков. Что такое комплементарность протомеров? В чем заключаются кооперативные конфигурации конформации протомеров?

Характеристики белков: амфотерность, ионизация (заряд), гидратация, растворимость. Что такое изоэлектрическая точка?

Молекулярная масса пептидов и белков. Методы ее определения (ультрацентрифугирование, гель-фильтрация).

Характеристики белковых смесей. Причины, стабилизирующие белковую Практическое значение цветных реакций молекулу в растворе. Коллоидные характеристики белков.

Денатурация белков. Причины, вызывающие денатурацию белков (физические, хим, био). Характеристики денатурированного белка.

Ренативация белка, ее механизмы.

Методы удаления белков из раствора: осаждение кислотами, томными металлами, органическими растворителями. Принцип реакций осаждения белка.

Методы чистки белковых смесей от примесей (высаливание, гель-фильтрация, диализ). Принцип Практическое значение цветных реакций способов.


prakticheskoe-zanyatie-6-sravnenie-dvuh-viborok.html
prakticheskoe-zanyatie-7-6-ch.html
prakticheskoe-zanyatie-7-sistema-personazhej.html